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Título : Determinación del potencial inhibitorio de la fracción alcaloidal de Psychotria stenostachya sobre xantina oxidasa y radical superóxido mediante autografía.
Autor : Rodríguez Torres, Huilmar Adrián
Director(es): Vinueza Tapia, Diego Renato
Tribunal (Tesis): Pilco Bonilla, Gisela Alexandra
Palabras claves : BIOQUÍMICA;ALCALOIDE;AUTOGRAFÍA (MÉTODO);ANTIOXIDANTE;GEL ANALYZER;OBENKAWE (Psychotria stenostachya );RADICAL SUPERÓXIDO;XANTINA OXIDASA
Fecha de publicación : 18-feb-2020
Editorial : Escuela Superior Politécnica de Chimborazo
Citación : Rodríguez Torres, Huilmar Adrián. (2020). Determinación del potencial inhibitorio de la fracción alcaloidal de Psychotria stenostachya sobre xantina oxidasa y radical superóxido mediante autografía. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobamba.
Identificador : UDCTFC;56T00915
Abstract : The main objective of this investigation was to determine the inhibitory potential of the alkaloidal fraction of Psychotria stenostachya on xanthine oxidase and superoxide radical by autography. In the first instance, an alcoholic maceration process of the leaves of P. stenostachya with methanol was carried out, for the subsequent liquid extraction of total alkaloids with organic solvents by means of pH variations, reaching a yield of 0.76%. Next, the components of the alkaloidal extract were separated through TLC, using chloroform / triethylamine / methanol as mobile phase in proportions (6: 0.5: 0.6) and developed in a UV chamber at 254 nm. Autograph tests were performed on TLC plates by means of the "dot blot" technique; 10 µ L of each solution was seeded at concentrations of 100, 50, 10, 5 and 1 µg using methanol as solvent. For the evaluation of the antioxidant potential of P.stenostachya, ascorbic acid was used as a standard for the DPPH * model, while for the determination of superoxide radical uptake taxifoline was used as a standard for the models: RIBOFLAVINA / LUZ / NBT and NADH / PMS / NBT. Finally, allopurinol was used as standard and xanthine as a substrate for the evaluation of inhibitory capacity on XO. In this way, a distinction is made between pure XO inhibitor and a 𝑂2∙ − scavenger. The results were presented qualitatively through changes in color and halo diameter. With respect to quantitative data, these were recorded using the GelAnalyzer program to determine the area of inhibition. As a result, the alkaloidal fraction of P. stenostachya was obtained having significant antioxidant capacity by being able to capture superoxide radical; however, it lacks inhibitory activity on Xanthine Oxidase since it did not show a reaction. It is recommended; more studies and analysis regarding the chemical and structural composition of the plant species.
Resumen : El objetivo principal de esta investigación fue determinar el potencial inhibitorio de la fracción alcaloidal de Psychotria stenostachya sobre xantina oxidasa y radical superóxido mediante autografía. En primera instancia, se llevó a cabo un proceso de maceración alcohólica de las hojas de P. stenostachya con metanol, para la posterior extracción líquida de alcaloides totales con solventes orgánicos mediante variaciones de pH, alcanzando un rendimiento de 0,76%. A continuación, se separaron los componentes del extracto alcaloidal a través de TLC, utilizando como fase móvil cloroformo/ trietilamina/metanol en proporciones (6:0.5:0.6) y se reveló en una cámara UV a 254 nm. Los ensayos autográficos se realizaron en placas de TLC por medio de la técnica “dot blot”; se sembró 10 μL de cada solución a concentraciones de 100, 50, 10, 5 y 1 μg utilizando como disolvente metanol. Para la evaluación del potencial antioxidante de P.stenostachya, se usó ácido ascórbico como estándar para el modelo DPPH*, mientras que para la determinación de captación de radical superóxido se empleó taxifolina como estándar para los modelos RIBOFLAVINA/LUZ/NBT y NADH/PMS/NBT. Finalmente, para la evaluación de capacidad inhibitoria sobre XO se utilizó alopurinol como estándar y xantina como sustrato. De esta manera se distingue entre inhibidor puro de XO y un captador de 𝑂2∙ −. Los resultados se presentaron de forma cualitativa a través de cambios de coloración y diámetro de halo. Con respecto a los datos cuantitativos, estos se registraron mediante el programa GelAnalyzer para determinar el área de inhibición. Como resultado se obtuvo la fracción alcaloidal de P. stenostachya teniendo capacidad antioxidante significativa al poder captar radical superóxido; sin embargo, carece de actividad inhibitoria sobre Xantina Oxidasa ya que no presentó reacción. Se recomienda más estudios y análisis con respecto la composición química y estructural de la especie vegetal.
URI : http://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/14075
Aparece en las colecciones: Bioquímico/a y Farmacéutico/a

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